本站小編為你精心準(zhǔn)備了藥用吉祥草的研究進(jìn)程參考范文，愿這些范文能點(diǎn)燃您思維的火花，激發(fā)您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

吉祥草是百合科植物中單種屬植物，又名觀音草、小葉萬年青，分布在我國華東、中南、西南各省區(qū)。吉祥草作為草藥在我國苗族地區(qū)應(yīng)用廣泛。民間一般采用傳統(tǒng)煎藥法，制作成吉祥草煎劑，供患者服用［1］。吉祥草全草主要含甾體、黃酮、木脂素、萜類、有機(jī)酸等多種化學(xué)成分，現(xiàn)代研究表明吉祥草還具有降血糖、抑制磷酸二酯酶以及殺滅釘螺等藥理活性。為了全面了解吉祥草的研究進(jìn)展，筆者對(duì)吉祥草的化學(xué)成分、提取方法和藥理作用等方面進(jìn)行系統(tǒng)的綜述，為開發(fā)利用具有藥用價(jià)值的吉祥草先導(dǎo)化合物提供科學(xué)依據(jù)。

1吉祥草化學(xué)成分研究

我國學(xué)者針對(duì)吉祥草的不同部位開展化學(xué)成分研究，分離得到系列新的化合物，為開展藥理作用研究奠定了堅(jiān)實(shí)的物質(zhì)基礎(chǔ)。各團(tuán)隊(duì)就所在地區(qū)的吉祥草在7月采摘，然后自然晾干后粉碎全草或利用根莖等部位進(jìn)行有效成分分離提取，分離得到許多新的化合物。王玉婷、ZHENG、王倩等［2-4］對(duì)湖北省長陽地區(qū)的吉祥草進(jìn)行系統(tǒng)的先導(dǎo)化合物的分離及化學(xué)成分研究。從吉祥草空干粉末狀根莖和新鮮根莖部位乙醇提取物發(fā)現(xiàn)了許多甾體化合物和黃酮類，其中2個(gè)甾體和2個(gè)苯丙類化合物:(25s)-22，3-dihdroxoy-5β-furost-3β(1)，26-diol-26-O-β-D-glucopyranosid(2)，26-O-β-D-glucopyranosylfurostane-3β，26-diol-3-O-β-D-gluco-pyranoside(3)，1-O-(6-O-α-L-rhamnopyranosyl-β-D-glucopyranosyl-2-hydroxy-4-allybenzene，Lariciresinol-9-O-β-D-glucopyranoside(4)為新化合物。陳苓麗等［5］對(duì)貴州產(chǎn)吉祥草全草通過水提、減壓濃縮，然后利用30%，60%和90%乙醇洗脫等工序進(jìn)行分離及化學(xué)成分研究，分離得到8個(gè)化合物，分別是:diosphenol(1)、N-benzoyl-L-phenylalaninol(2)、大豆素(3)、3‘-羥基大豆苷元(4)、bis(2-ethylhexyl)phthalate(5)、鄰苯二酸二正丁酯(6)、丁香脂素(7)、刺五加酮(8)，化合物1為新的天然產(chǎn)物，化合物2—8為首次從該屬植物中分離得到。WANG等［6］在2012年對(duì)空干粉末全草利用水回流3h進(jìn)行分離提取，得到2個(gè)新的螺旋甾烷醇異構(gòu)體皂苷(25R)-5b-spirostane-(1a，3a)-diol(1)和(25R)-5b-spirostane-(1a，2a，3a，4a)-tetrol(2)。HU等［7］對(duì)云南產(chǎn)干燥吉祥草70%醇提取物進(jìn)行化學(xué)成分分析，得到5個(gè)化合物，分別為26-O-β-D-glucopyranosyl-(25S)-5β-furost-20(22)-en-1α，3β，26-triol-1-O-α-L-arabinopyranosyl-(1→2)-［α-L-rhamnopyranosyl］-3-O-α-L-rhamnopyranoside(1)，(1β，3β，16β，22S)-cholest-5-en-1，3，16，22-tetrol-1，16-di-(β-D-glucopyranoside)(2)，diosgenin(3)，β-sitosterol(4)，ecdysterone(5)，其中化合物1為一種新的呋甾皂苷化合物。張東東等［8］對(duì)陜西省吉祥草進(jìn)行醇提取，后經(jīng)石油醚正丁醇提取，得到水飽和正丁醇提取部位，分離鑒定9個(gè)甾體類化合物，分別為薯蕷皂苷元(1)、奇梯皂苷元(2)、潘托落皂苷元(3)、β-豆甾醇(4)、β-豆甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、kitigenin5-O-β-D-glucopyrannoside(6)、pentologenin5-O-β-D-glucopyrannoside(7)、薯蕷皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、25(S)-5β-1β-3β-diol(9)，其中化合物8和9為首次從該屬植物中分離得到。SONG、ZHANG等［9-10］對(duì)吉祥草空干后整草部位進(jìn)行80%乙醇提取物分析，又發(fā)現(xiàn)3個(gè)甾體皂苷化合物26-O-β-d-glucopyranosyl-(25S)-20-O-methyl-5β-furost-22(23)-en-1β，3β，20α，26-tetraol1-O-β-d-fucopyranosyl-(1→2)-［α-l-rhamnopyranosyl］-3-O-α-l-rhamnopyranoside(1)，26-O-β-d-gluco-pyranosyl-(25S)-20-O-methyl-5β-furost-22(23)-en-1β，3β，20α，26-tetraol1-O-β-d-xylopyranosyl-(1→2)-［α-l-rhamnopyranosyl］-3-O-α-l-rhamnopyranoside(2)，(25S)-5β-spirostan-1β，3β-diol1-O-β-d-fucopyranosyl-(1→2)-［α-l-rhamnopyranosyl］-3-O-α-l-rhamno-pyranoside(3)。

2有效成分提取及測定方法研究

2．1提取工藝研究羅夫來等［11］用響應(yīng)面法研究吉祥草提取工藝。結(jié)果表明，對(duì)吉祥草的料液比為20．39∶1(g/mL)，81．24℃條件下，水浴回流提取2次，每次79．76min進(jìn)行提取，吉祥草皂苷得率為1．36%。吉祥草藥材皂苷含量在2．743～13．825mg•g－1，平均為1．657mg•g－1。丁麗娜等［12］采用正交實(shí)驗(yàn)法研究吉祥草的水提醇沉工藝，得出總皂苷的水提醇沉工藝為10倍量水提取，濃縮比相當(dāng)于生藥0．5g•mL－1，醇沉濃度50%，效果最好。

2．2測定方法研究及標(biāo)準(zhǔn)建立劉麗娜等［13］建立HPLC-ELSD法測定吉祥草中皂苷A含量的方法。該方法簡便、快速、準(zhǔn)確、靈敏度高，可用于吉祥草中皂苷A含量測定，具體條件是采用AglientEclipse-XDB-C18色譜柱(4．6mm×150mm，5μm)，甲醇-水(46∶54)為流動(dòng)相，流速1．0mL•min－1，霧化空氣壓力0．30MPa，ELSD漂移管溫度40℃，柱溫40℃。結(jié)果表明，皂苷A進(jìn)樣量在0．618～9．888μg呈良好線性關(guān)系(r=0．9998)，平均回收率為99．11%，RSD=2．47%。田源紅等［14］對(duì)吉祥草中阿魏酸和蘆丁建立HPLC測定方法。結(jié)果表明:阿魏酸在0．40～2．40μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系(r=0．9999)，平均回收率為100．1%，RSD為2．8%;蘆丁在0．625～5．625μg范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系(r=0．9999)，平均回收率為100．7%，RSD為1．3%。金兆磊等［15］利用HPLC-ELSD法進(jìn)一步建立不同產(chǎn)地吉祥草藥材吉祥草的指紋圖譜，共找到共有峰6個(gè)，該方法具有良好的重復(fù)性和穩(wěn)定性，為有效控制吉祥草藥材的質(zhì)量和評(píng)價(jià)其質(zhì)量品質(zhì)提供理論依據(jù)。安斯揚(yáng)等［16］對(duì)多產(chǎn)地吉祥草藥材中水分、總灰分、酸不溶性灰分、農(nóng)藥殘留、重金屬、浸出物及總皂苷含量進(jìn)行定量測定，進(jìn)一步完善吉祥草藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了依據(jù)。HOU等［17］提出細(xì)胞膜色譜(cellmembranechromatography，CMC)，用于吉祥草的藥理分析，可以揭示藥物和受體相互作用，用于活性物質(zhì)的篩選，具有較好的應(yīng)用前景。

3藥理活性

3．1抗腫瘤活性與作用機(jī)制研究劉海等［18］探討吉祥草及其果實(shí)的乙醇提取物及其不同溶劑萃取部位對(duì)腫瘤細(xì)胞的體外抑制作用，篩選抗腫瘤活性部位。分別以人腎透明細(xì)胞腺癌786-O細(xì)胞、人結(jié)腸癌HT-29細(xì)胞及人肺腺癌A549細(xì)胞為供試細(xì)胞，采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法對(duì)吉祥草及其果實(shí)不同提取部位進(jìn)行體外抗腫瘤活性篩選。結(jié)果表明:吉祥草乙醇提取部位、正丁醇分離部位及其果實(shí)乙酸乙酯分離部位、正丁醇分離部位對(duì)腫瘤細(xì)胞均有不同程度的抑制作用，其中吉祥草正丁醇分離部位對(duì)786-O、HT-29、A549的細(xì)胞毒性較強(qiáng)，其半數(shù)抑制濃度(IC50)分別為92．78，96．04，63．24mg•L－1，果實(shí)正丁醇分離部位對(duì)786-O、HT-29、A549細(xì)胞有一定的增殖抑制作用，其IC50分別為179．03，189．67，329．95mg•L－1。研究表明吉祥草正丁醇分離部位是吉祥草主要的抗腫瘤活性部位。楊小姣等［19］研究吉祥草中甾體皂苷RCE-4對(duì)宮頸癌裸鼠移植瘤的抑制作用。將Caski(4×107•mL－1)細(xì)胞懸液0．3mL接種于裸鼠右側(cè)后腿背部皮下，建立宮頸癌移植瘤模型，然后按瘤體積大小隨機(jī)分為模型組、紫杉醇(10mg•kg－1)和RCE-4(25，50，100mg•kg－1)組，每天1次給藥，連續(xù)4周。末次給藥次日處死裸鼠，稱定裸鼠體質(zhì)量、瘤質(zhì)量，測量腫瘤體積，通過計(jì)算抑瘤率，在光鏡下觀察移植瘤組織形態(tài)學(xué)變化，TUNEL染色測定細(xì)胞凋亡率，免疫組化檢測腫瘤組織中環(huán)氧化酶2(COX-2)表達(dá)，熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測定移植瘤組織中B淋巴細(xì)胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax、Caspase-3和Caspase-9mRNA表達(dá)，計(jì)算Bcl-2/Bax值，Westernblotting檢測移植瘤組織中Survivin蛋白表達(dá)。發(fā)現(xiàn)RCE-4(25，50，100mg•kg－1)可明顯降低宮頸癌裸鼠移植瘤的體積和瘤質(zhì)量(P＜0．05或P＜0．01)，上調(diào)Bax、Caspase-3和Caspase-9mRNA表達(dá)，下調(diào)Bcl-2mRNA表達(dá)和COX-2、Survivin蛋白表達(dá)及Bcl-2/Bax值(P＜0．05或P＜0．01)。研究結(jié)果表明:RCE-4對(duì)宮頸癌裸鼠移植瘤的生長具有顯著抑制作用，其機(jī)制可能與其上調(diào)Bax、Caspase-9、Caspase-3的表達(dá)和下調(diào)Survivin、Bcl-2、COX-2的表達(dá)有關(guān)。楊小姣等［20］進(jìn)一步探討吉祥草中甾體皂苷RCE-4激活p53-ROS通路誘導(dǎo)人肝癌HepG2細(xì)胞的表現(xiàn)，深入研究了吉祥草中RCE-4對(duì)HepG2的抑制作用及分子機(jī)制。主要采用不同濃度的RCE-4處理HepG2細(xì)胞不同時(shí)間后，通過MTT法檢測不同濃度RCE-4對(duì)HepG2細(xì)胞增殖的影響，并用DCFH-DA熒光探針標(biāo)記進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)的活性氧水平檢測，Hoechst33258染色觀察細(xì)胞形態(tài)變化，AnnexinV-FITC/PI染色測定細(xì)胞凋亡率，PI標(biāo)記測定細(xì)胞周期，JC-1染色法測定細(xì)胞線粒體跨膜電位水平，Caspase試劑盒檢測HepG2細(xì)胞中Caspase-9和Caspase-3的活性，Westernblotting檢測Bcl-2、Bax和p53蛋白表達(dá)，并計(jì)算Bcl-2與Bax的比值。研究結(jié)果表明:RCE-4在16．2～50．0μmol•L－1濃度范圍內(nèi)對(duì)HepG2細(xì)胞的生長抑制作用呈明顯的時(shí)間-劑量依賴性，當(dāng)藥物濃度達(dá)到12．5μmol•L－1時(shí)，抑制率最大達(dá)到54．2%，并且經(jīng)分析軟件進(jìn)行計(jì)算其IC50值為12．03μmol•L－1;RCE-4(6．25，12．5和25．0μmol•L－1)處理HepG2細(xì)胞12，24和48h均能顯著抑制HepG2細(xì)胞增殖，促進(jìn)其凋亡(P＜0．05或P＜0．01);當(dāng)藥物濃度為25．0μmol•L－1，作用時(shí)間24h時(shí)，其抑制率高達(dá)93．4%。RCE-4(6．25，1．25和25．0μmol•L－1)處理HepG2細(xì)胞24h后可顯著增加HepG2細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平，抑制細(xì)胞凋亡，阻滯細(xì)胞周期于G2/M期，降低線粒體膜電位，上調(diào)Bax和p53蛋白表達(dá)，下調(diào)Bcl-2蛋白表達(dá)和Bcl-2與Bax的比值，增強(qiáng)Caspase-9和Caspase-3的活性(P＜0．05或P＜0．01)。研究表明RCE-4可顯著抑制HepG2細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)凋亡，其作用機(jī)制可能與其增加細(xì)胞內(nèi)ROS水平，促進(jìn)p53及下游靶基因Bax表達(dá)，增強(qiáng)Caspase-9和Caspase-3活性，抑制Bcl-2表達(dá)，降低Bcl-2和Bax比值及線粒體膜電位，阻滯細(xì)胞于G2/M期有關(guān)。

3．2抗氧化活性曾文等［21］還對(duì)吉祥草中5種提取物對(duì)神經(jīng)細(xì)胞的抗氧化作用功效進(jìn)行研究。建立過氧化氫(H2O2)所致人神經(jīng)母細(xì)胞瘤株SH-SY5Y細(xì)胞系氧化應(yīng)激損傷模型，應(yīng)用MTT法探討RC-1、RC-2、RC-3、RC-4和RC-5的細(xì)胞毒性及抗氧化保護(hù)作用。結(jié)果表明，RC-1、RC-2、RC-3、RC-4均表現(xiàn)出一定的抗氧化活性，在10μg•mL－1時(shí)，RC-2、RC-3和RC-4分別比模型對(duì)照組存活率高42．8%，42．9%和47．9%。結(jié)果表明吉祥草及其提取物可以作為一種潛在的抗神經(jīng)退行性疾病藥物進(jìn)行開發(fā)和利用。王慧等［22］對(duì)吉祥草中總黃酮的體外抗氧化活性進(jìn)行研究，采用鹽酸-鎂粉法測定黃酮含量，通過1，1-二苯基-2-三硝基苯肼(1，1-diphenyl-2-picrylhydrazyl，DPPH)法和鐵離子還原(ferricionantioxidantpower，F(xiàn)RAP)法評(píng)價(jià)吉祥草總黃酮提取物的抗氧化活性。結(jié)果表明，吉祥草中總黃酮具有較強(qiáng)的抗氧化活性，總黃酮提取物和脂溶性成分的半數(shù)有效濃度(EC50)為(0．253±0．009)g•L－1，F(xiàn)RAP值為(0．964±0．028)mmol•g－1。

3．3抗炎活性金兆磊等［23］研究吉祥草藥材抗炎、止咳作用及譜效關(guān)系，分別采用二甲苯致小鼠耳廓腫脹法、小鼠氨水引咳法，觀察吉祥草藥材不同提取部位抗炎、止咳作用。結(jié)果表明，吉祥草藥材食用乙醇提取物3個(gè)劑量給藥組抗炎作用非常顯著(P＜0．05)，大、小劑量組明顯延長咳嗽時(shí)間(P＜0．05)，大劑量組明顯減少咳嗽次數(shù)(P＜0．05);水提物3個(gè)劑量組同樣具有明顯抗炎作用(P＜0．05)，水提物大劑量組咳嗽次數(shù)明顯增多(P＜0．05)，咳嗽時(shí)間縮短(P＜0．05);石油醚提取物各劑量組抗炎及止咳作用不顯著。HAN等［24］對(duì)吉祥草中60%～90%醇提取物進(jìn)行化痰和鎮(zhèn)咳效果評(píng)價(jià)，在0．372g•kg－1劑量可有效降低咳嗽次數(shù)。可見，吉祥草藥材食用乙醇提取物及水提物具有較好的抗炎、止咳活性。付雪嬌等［25］針對(duì)吉祥草乙酸乙酯提取物及該部位分離得到的化合物RCE-4的抗炎活性及機(jī)制，采用細(xì)菌脂多糖(LPS)刺激經(jīng)佛波酯(PMA)誘導(dǎo)的人單核細(xì)胞THP-1體外炎癥模型檢測其干預(yù)前后上清液中促炎細(xì)胞因子(IL-1β、IL-6和TNF-α)的分泌量，角叉菜膠致小鼠足趾腫脹模型檢測其腫脹抑制率，通過佐劑關(guān)節(jié)炎模型檢測組織內(nèi)和血清中一氧化氮(NO)的含量。結(jié)果表明，化合物RCE-4能顯著減少促炎因子的分泌量(P＜0．01)，抑制角叉菜膠致小鼠足趾腫脹作用(P＜0．05)，減少佐劑性關(guān)節(jié)炎模型組織內(nèi)和血清中NO的含量(P＜0．01)，并且抑制作用具有時(shí)間和劑量依賴性。表明吉祥草乙酸乙酯提取物及RCE-4具有明顯的抗炎活性，其作用機(jī)制可能與抑制促炎細(xì)胞因子和NO的釋放有關(guān)。

4展望

通過對(duì)該藥材的化學(xué)成分、指紋圖譜、藥理等系統(tǒng)研究發(fā)現(xiàn)，吉祥草在抗炎、抗腫瘤方面具有巨大的應(yīng)用前景。目前對(duì)其作用機(jī)制和藥動(dòng)學(xué)方面的研究還有待進(jìn)一步加強(qiáng)，為新藥發(fā)現(xiàn)和成藥研究奠定更加科學(xué)的基礎(chǔ)。

作者：邢翔飛1，金桂蘭1，奚煒1，陳劍鋒1，2，程凡1，2，鄒坤1，2，龔大春1，2 單位：1．三峽大學(xué)人民醫(yī)院藥物制劑研究所，2．三峽大學(xué)天然產(chǎn)物研究與利用湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室