本站小編為你精心準(zhǔn)備了天然產(chǎn)物二氫楊梅素的利用研究參考范文，愿這些范文能點(diǎn)燃您思維的火花，激發(fā)您的寫作靈感。歡迎深入閱讀并收藏。

摘要:二氫楊梅素是藤茶中存在的一種重要的活性物質(zhì)為一種黃酮類化合物具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化、調(diào)節(jié)血脂和血糖以及免疫力等多種藥理功效具有研究開發(fā)潛力本文對(duì)二氫楊梅素的來源、理化性質(zhì)、提取分離、測(cè)定方法及生物活性等方面進(jìn)行綜述為其深入研究及全面開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)

關(guān)鍵詞:二氫楊梅素;黃酮類化合物;生物活性

二氫楊梅素(357345￣六羥基￣23雙氫黃酮醇dihydromyricetin簡(jiǎn)稱DMY或DHM)是由Kotake和Kubota在1960年從蛇葡萄屬植物楝葉玉葡萄(Ampelopsismeliaefolia(Hand.￣Mazz.)W.T.Wang)的葉中首次分離得到[1]命名為蛇葡萄素1996年周天達(dá)等[2]又從藤茶的莖葉中分離得到該化合物并命名為現(xiàn)名已有研究表明該物質(zhì)具有抗氧化、抗炎、抗癌、保肝、調(diào)節(jié)血脂和血糖等[3￣6]諸多生物活性目前對(duì)于DMY已有廣泛的研究本文對(duì)DMY的來源、理化性質(zhì)、提取分離、測(cè)定方法以及生物活性進(jìn)行綜述以期為其全面開發(fā)利用提供有價(jià)值的參考

1DMY的簡(jiǎn)介

DMY存在于葡萄科、楊梅科、杜鵑科、藤黃科、大戟科及柳科等植物中大量存在于葡萄科蛇葡萄屬植物中如顯齒蛇葡萄(A.grossedentata)[7￣8]、羽葉蛇葡萄(A.chaffanjonii)[9]、粵蛇葡萄(A.cantoniesis)[10]、蛇葡萄(A.sinica)[11]、光葉蛇葡萄(A.sinicavar.hancei)[12]、東北蛇葡萄(A.brevipedunculata)[13￣14]等廣泛分布于我國(guó)多省如廣東、廣西、云南、湖南、湖北、江西等顯齒蛇葡萄植物幼嫩莖葉中其含量可達(dá)40％[15]其次是老葉中含19.98％莖枝含2.34％根部微量[16]DMY作為天然產(chǎn)物在植物中單體含量如此之高是很少見的DMY是白色針狀結(jié)晶mp:245~246℃常溫和冷水中溶解度較低易溶于熱水、熱乙醇、甲醇微溶于乙酸乙酯難溶于氯仿、石油醚[2]其多酚羥基結(jié)構(gòu)特點(diǎn)決定性質(zhì)的不穩(wěn)定pH值、溫度、金屬離子、溶劑等諸多因素對(duì)DMY的穩(wěn)定性均有影響[17]pH值是影響其穩(wěn)定性的重要因素經(jīng)研究酸性和中性條件(pH<7)是DMY應(yīng)用和保藏的適宜條件其次是溫度隨溫度的增加會(huì)增加其不穩(wěn)定性發(fā)生不可逆的氧化反應(yīng)采用紫外￣可見光譜掃描法分析發(fā)現(xiàn)DMY水溶液在溫度不超過100℃時(shí)間不超過30min的條件下加熱其化學(xué)結(jié)構(gòu)可保持穩(wěn)定DMY對(duì)不同的金屬離子敏感程度不同金屬離子Ca2＋Mg2＋Na＋NH4＋Ba2＋對(duì)于DMY穩(wěn)定性均無明顯的作用Al3＋Fe3＋Cu2＋等則對(duì)DMY的氧化起到誘導(dǎo)催化作用在提取和應(yīng)用過程中需要避免接觸另外溶劑是否含水對(duì)其穩(wěn)定性也是存在影響的

2DMY的提取分離及測(cè)定方法

DMY的提取方法主要包括溶劑(有機(jī)溶劑、熱水、堿液)提取、酶法提取、超臨界CO2萃取、超聲技術(shù)提取、微波技術(shù)提取等陳雁梅等[18]用酶法提取藤茶莖中DMY工藝研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)在溫度45℃pH為4.46酶添加量2.0％料液質(zhì)量體積比1∶20(g/mL)的條件下DMY提取率30.65％純度23.4％酶法提取優(yōu)于常規(guī)熱提法同醇提法相比提取率提高10％左右沈露[19]采用CO2超臨界流體萃取顯齒蛇葡萄中DMY通過正交試驗(yàn)確定DMY的最佳提取條件為:提取壓力25MPa、提取溫度50℃、萃取時(shí)間1.5h、CO2流量為20L/h時(shí)提取率為15.40％王延偉等[20]采用響應(yīng)面法優(yōu)化Tween￣80超聲提取藤茶DMY工藝結(jié)果顯示料液比30mL/gTween￣80濃度6.8％超聲溫度54℃超聲時(shí)間29min藤茶中DMY的提取得率為355.8mg/g與理論值(353.7mg/g)的相對(duì)誤差很小充分說明了提取工藝的可靠性鄭成等[21]探討了微波輻射對(duì)藤茶細(xì)胞的破壁作用及適宜的破壁條件對(duì)DMY的微波動(dòng)態(tài)循環(huán)階段連續(xù)逆流提取進(jìn)行研究建立微波輔助提取DMY的動(dòng)力學(xué)模型應(yīng)用DesignExPert7.0軟件結(jié)合實(shí)際情況得出微波動(dòng)態(tài)循環(huán)階段連續(xù)逆流提取DMY的最佳操作條件:以水為溶劑提取溫度95℃提取時(shí)間10min液料比25∶1pH5何桂霞等[22]采用薄層掃描法測(cè)定藤茶中DMY的含量結(jié)果顯示藤茶中DMY的含量為38.17％~38.54％回收率為98.5％RSD為1.6％陳圖鋒等[23]建立以高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定藤茶中DMY和楊梅素含量的方法色譜條件為色譜柱是SUPELCODiscoveryC18HPL(25cm×4.6nm5μm)流動(dòng)相為甲醇￣0.03％磷酸溶液采用梯度洗脫流速為0.8mL/min楊梅素和DMY檢測(cè)波長(zhǎng)分別為373nm和290nm結(jié)果顯示:藤茶中DMY和楊梅素分別在0.15~94.0mg/L(R2＝1)和0.62~77.50mg/L(R2＝0.997)濃度范圍內(nèi)有良好線性關(guān)系平均加標(biāo)回收率分別為89.7％、93.5％RSD<4.5％

3DMY的活性研究

3.1抗氧化活性DMY具有著良好的抗氧化效果和潛在的激發(fā)細(xì)胞活力的活性[24]郭清泉等[25]采用量子化學(xué)計(jì)算法探討DMY抗氧化機(jī)制通過DMY的各量子化學(xué)參數(shù)與抗氧化活性之間的關(guān)系確定影響物質(zhì)抗氧化活性的主要因素提出了DMY分子的抗氧化活性中心在其分子結(jié)構(gòu)的B環(huán)3′4′5′位連酚羥基上張友勝等[26￣27]從顯齒蛇葡萄植物中提取和純化的DMY發(fā)現(xiàn)其對(duì)穩(wěn)定自由基DPPH的清除率高達(dá)73.3％~91.5％DMY(0.01％~0.04％)可抑制亞油酸過氧化其作用效果等同或優(yōu)于TBHQDMY在FeSO4引發(fā)的亞油酸過氧化體系中的抗氧化機(jī)制為絡(luò)合Fe2＋阻止由Fe2＋引發(fā)的亞油酸過氧化何桂霞等[28]采用分光光度法測(cè)定DMY對(duì)由Fe2＋維生素C(Fe2＋￣VitC)、Fe2＋￣過氧化氫(Fe2＋￣H2O2)、Fe￣半胱氨酸(Fe2＋￣Cys)3種不同體系誘導(dǎo)的心、肝、腦線粒體脂質(zhì)過氧化的抑制作用結(jié)果發(fā)現(xiàn)DMY能夠明顯抑制大鼠心肌、肝和腦組織勻漿中丙二醛(MDA)的生成在濃度為5~20μmol/L時(shí)隨著濃度的增加抑制MDA生成的作用增強(qiáng)DMY對(duì)脂肪氧化酶有明顯的抑制作用EC50為6.7~74.1mmol能競(jìng)爭(zhēng)性抑制脂肪氧化酶活性位點(diǎn)的亞油酸[29]

3.2抗腫瘤活性DMY通過抑制腫瘤細(xì)胞的增殖、促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞侵襲遷移的作用發(fā)揮抗腫瘤活性[30￣32]用不同濃度的DMY處理肝MHCC97L細(xì)胞后分別檢測(cè)細(xì)胞的黏附能力、遷移與侵襲能力以及E￣cadherin、MMP￣2、MMP￣9和VEGF蛋白表達(dá)結(jié)果發(fā)現(xiàn)經(jīng)DMY處理后的MHCC97L細(xì)胞黏附力明顯降低、侵襲與遷移力明顯減弱E￣cadherin表達(dá)明顯上調(diào)而MMP￣9、VEGF蛋白表達(dá)明顯下調(diào)的水平但MMP￣2蛋白的表達(dá)無明顯改變由此可見DMY可能通過調(diào)控E￣cadherin、MMP￣9和VEGF蛋白的表達(dá)抑制肝癌細(xì)胞的黏附、遷移和侵襲[33]用DMY當(dāng)抑制劑以乳腺癌MCF￣7細(xì)胞為研究對(duì)象采用MTT法、流式細(xì)胞術(shù)法和免疫細(xì)胞化學(xué)來分析乳腺癌細(xì)胞MCF￣7增殖、凋亡的情況當(dāng)濃度大于20μg/mL的DMY時(shí)出現(xiàn)了抑制效果但不佳當(dāng)40與80μg/mL的DMY時(shí)明顯地抑制乳腺癌細(xì)胞MCF￣7的增殖且濃度越大其敏感性越高當(dāng)DMY為80μg/mL時(shí)其IC50為226.9μg/mL抑制率和IC50分別與0μg/mLDMY效果對(duì)比分析可見對(duì)乳腺癌患者采用DMY可以有效抑制癌細(xì)胞快速增殖加速器凋亡減緩患者病情療效突出[34]此外DMY可能通過PI3K/Akt信號(hào)通路抑制絨癌MMP￣2mRNA的表達(dá)進(jìn)而抑制絨癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移達(dá)到抗腫瘤活性的作用[35]

3.3降血糖、降血脂活性通過以藤茶葉為原料采用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型觀察DMY的降血糖效果結(jié)果發(fā)現(xiàn)DMY對(duì)高血糖模型小鼠有明顯的降血糖效果[36]劉愷等[37]通過取正常SD大鼠晶狀體制備醛糖還原酶以依帕司他為陽性對(duì)照觀察DMY體外對(duì)醛糖還原酶的抑制作用。結(jié)果發(fā)現(xiàn):隨著DMY濃度的增加醛糖還原酶的活性逐漸降低且呈一定的劑量￣效應(yīng)關(guān)系說明DMY在體外有抑制醛糖還原酶的作用逯鳳肖等[38]通過注射四氧嘧啶建立糖尿病小鼠模型以二甲雙胍為陽性對(duì)照研究藤茶中DMY的降糖作用結(jié)果發(fā)現(xiàn):DMY對(duì)四氧嘧啶糖尿病小鼠有降糖作用其降糖機(jī)制可能是通過提高抗氧化作用減輕四氧嘧啶對(duì)肝臟和胰島B細(xì)胞的損傷促進(jìn)了肝糖原和胰島素的合成利用高脂飼料誘導(dǎo)大鼠高脂血癥模型探討藤茶中主要活性成分黃酮及DMY對(duì)高血脂癥小鼠的降血脂效果發(fā)現(xiàn)DMY對(duì)高脂血癥小鼠體重有明顯減輕作用并且能不同程度降低小鼠血清TC、TG、LDL￣C、MDA含量提高血清HDL￣C含量及SOD活性降低肝系數(shù)[39]劉海紅[40]通過研究探討DMY對(duì)高脂誘導(dǎo)的非酒精性脂肪肝小鼠的保護(hù)作用及作用機(jī)制中發(fā)現(xiàn)DMY能夠降低肝臟脂質(zhì)沉積保護(hù)肝損傷從而改善高脂飼料誘導(dǎo)的ApoE￣/￣小鼠非酒精性脂肪肝其機(jī)制可能與其通過下調(diào)AMPK磷酸化水平進(jìn)而抑制肝細(xì)胞凋亡有關(guān)馬鑫等[41]在探討肝臟線粒體融裂相關(guān)基因表達(dá)變化在DMY抑制高脂喂養(yǎng)小鼠肝臟脂肪蓄積中的可能作用發(fā)現(xiàn)DMY干預(yù)顯著抑制高脂喂養(yǎng)誘導(dǎo)的肝臟指數(shù)、空腹血糖、空腹胰島素和血甘油三酯的升高肝臟脂肪蓄積以及肝臟ATP含量的降低并且明顯拮抗高脂誘導(dǎo)的線粒體分裂與融合基因mRNA和蛋白的表達(dá)水平變化

3.4解酒保肝活性Hase等[42]在進(jìn)行解除酒精中毒劑實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)用從H.dulcis中提出的DMY作為解除酒精中毒劑效果最佳隨后發(fā)現(xiàn)DMY解除酒精中毒的原理主要是通過加速分解乙醇的代謝物乙醛為無害物質(zhì)從而保護(hù)肝減輕乙醇對(duì)肝的損傷劉建新等[43]用顯齒蛇葡萄植物水煎劑進(jìn)行解酒實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示隨其水煎劑濃度的加大小鼠跌倒反應(yīng)百分率和步態(tài)不穩(wěn)百分率都下降證實(shí)其具緩解酒醉反應(yīng)促進(jìn)醒酒的作用該實(shí)驗(yàn)雖然沒有用DMY單體但顯齒蛇葡萄植物的主要成分為DMY說明DMY具有減輕乙醇中毒的作用潘人琦等[44]采用53℃林城老酒一次性灌胃法建立小鼠醉酒模型通過酒前酒后給藥、高低劑量組的對(duì)比觀察DMY對(duì)急性乙醇中毒的影響來研究其解酒作用結(jié)果表明:DMY預(yù)防給藥可以明顯延長(zhǎng)小鼠翻正反射消失時(shí)間顯著縮短維持時(shí)間醉酒小鼠給予DMY后顯著縮短了醒酒時(shí)間說明DMY具有一定的防醉解酒作用且其防醉效果比解酒效果顯著蘇東林等[45]通過對(duì)DMY的急性毒性及對(duì)酒精性肝損傷的防治效果進(jìn)行研究結(jié)果表明:DMY能有效阻止昆明種小鼠體內(nèi)由酒精導(dǎo)致的肝臟還原型谷胱甘肽耗竭和丙二醛升高降低甘油三酯含量減輕肝細(xì)胞脂肪變性程度具有較好的預(yù)防和治療酒精性肝損傷功效DMY還能夠有效阻止因酒精導(dǎo)致的肝臟還原型谷胱甘肽耗竭和丙二醛升高降低甘油三酯含量減輕肝細(xì)胞脂肪變性程度具有較好的預(yù)防和治療酒精性肝損傷效果[46]

3.5其他作用此外DMY還具有抑菌、抗炎鎮(zhèn)痛、祛痰止咳、免疫、防治腎結(jié)石、預(yù)防神經(jīng)退行性疾病等作用DMY對(duì)枯草芽胞桿菌、金黃色葡萄球菌、沙門菌、大腸桿菌、產(chǎn)氣桿菌、啤酒酵母、黏紅酵母、青霉、黑曲霉、毛霉菌及根霉菌、綠膿桿菌、甲型溶血型鏈球菌、乙型溶血型鏈球菌、肺炎雙球菌、白色鏈球菌16種細(xì)菌均有一定的抑制生長(zhǎng)繁殖作用[47]藤茶對(duì)小鼠巴豆油性耳廓水腫大鼠角叉菜膠性、甲醛性足腸腫脹及腹腔毛細(xì)血管通透性均具有抑制作用提示藤茶對(duì)急性、亞急性炎癥的滲出過程具有抑制作用對(duì)大鼠棉球肉芽腫增生具有抑制作用表明其對(duì)慢性增殖性炎癥也抑制作用其對(duì)小鼠醋酸性扭體反應(yīng)和熱板反應(yīng)的抑制作用顯示藤茶具有一定的鎮(zhèn)痛作用能提高小鼠的痛闌水平[48]藤茶具有抗炎鎮(zhèn)痛作用而DMY為藤茶的主要活性物質(zhì)DMY有明顯的祛痰止咳作用能延長(zhǎng)咳嗽潛伏期和減少咳嗽次數(shù)能升高酚紅排泌量[49]DMY能顯著提高小鼠單核￣巨噬細(xì)胞吞噬功能和溶血素含量增強(qiáng)免疫功能[50]閆猛等[51]研究藤茶中DMY對(duì)預(yù)防大鼠腎結(jié)石的作用機(jī)制結(jié)果表明:DMY能夠降低大鼠血清BUN、Cr和尿中Ca、UA含量增加腎組織SOD活性降低MDA含量從而降低細(xì)胞的損傷程度抑制草酸鈣結(jié)石的形成說明DMY對(duì)大鼠腎結(jié)石有一定的防治作用應(yīng)曜宇等[52]通過行為學(xué)檢測(cè)喂食不同DMY濃度果蠅的壽命及爬行結(jié)果分析DMY對(duì)鋁暴果蠅神經(jīng)退行性變的作用結(jié)果發(fā)現(xiàn)DMY對(duì)鋁暴果蠅神經(jīng)退行性變具有一定的保護(hù)作用

4前景展望

DMY作為一種極具藥用價(jià)值的天然產(chǎn)物在自然界植物中含量豐富提取成本低藥理活性強(qiáng)主要體現(xiàn)在抗腫瘤、解酒護(hù)肝、抗菌消炎、抗氧化等方面目前關(guān)于DMY來源、提取分離、結(jié)構(gòu)鑒定、含量測(cè)定及藥理作用已有廣泛的研究但其本身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)導(dǎo)致的穩(wěn)定性差、溶解度低和吸收代謝快等缺陷使其生物利用度低成藥性較差臨床應(yīng)用受限其在生物體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄生物轉(zhuǎn)化過程以及代謝產(chǎn)物等藥動(dòng)學(xué)基礎(chǔ)研究缺乏藥效學(xué)基礎(chǔ)研究不夠深入藥理學(xué)研究的臨床研究部分相對(duì)薄弱DMY在分子水平、細(xì)胞水平、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床研究等方面有待更深入的研究其潛在藥用價(jià)值將進(jìn)一步顯現(xiàn)為研制成為新的藥品或保健品提供理論依據(jù)。

作者：謝蓉蓉孫福強(qiáng)單位：廣東藥科大學(xué)藥學(xué)院