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【摘要】目的確定復方芪麝片中青風藤、防己藥味提取工藝。方法采用正交實驗法以粉防己堿和青藤堿含量為指標，考察乙醇濃度、乙醇量、提取時間、提取次數4個因素對青風藤等藥味提取工藝的影響。結果藥材以70%的乙醇為提取液，加醇量為藥材的14倍，提取3次，2h/次。結論該優化工藝可行。

【關鍵詞】復方芪麝片；正交實驗；提取工藝；粉防己堿和青藤堿

復方芪麝片為主治氣虛血瘀兼痰濕阻絡型頸椎病的中藥復方制劑,由黃芪、麝香、青風藤、川芎等中藥組成,具有益氣活血、化痰通絡、消腫止痛的作用，臨床效果較好。方中青風藤為臣藥，防己為佐藥，其主要有效成分均為生物堿，即粉防己堿和青藤堿。現代藥理研究證實青藤堿具有抗炎、免疫抑制、鎮痛、降壓、抗心律失常等藥理作用［1,2］。易丹丹等［3］研究發現青藤堿凝膠對大鼠佐劑性關節炎具有治療作用,且效果良好。粉防己堿具有廣譜抗炎作用,對局部和全身的多種急、慢性炎癥、免疫性炎癥、煙霧吸入性肺損傷、四氯化碳性肝損傷均有顯著的抑制作用，其抗炎作用是多方面的,對炎癥的各個環節均有不同程度的抑制作用［4,5］。此外粉防己堿還具有抗心肌缺血、抗腫瘤等作用［6,7］。根據方中兩藥味有效成分理化性質的特征，本研究選擇乙醇作為提取溶劑，擬通過正交實驗對醇提工藝中乙醇濃度、乙醇用量、提取時間、提取次數這4個因素進行考察，以粉防己堿和青藤堿含量為指標成分篩選工藝條件。

1材料與儀器

防己購自上海養和堂藥材有限公司，經上海中醫藥大學生藥教研室鑒定為防己科植物粉防己StephaniatetrandraS.Moore的干燥根。

青風藤購自上海養和堂藥材有限公司，經上海中醫藥大學生藥教研室鑒定為防己科植物青藤Sinomeniumacutum(Thunb.)Rehd.etWils.及毛青藤S.acutum(Thunb.)Rehd.etWils.var.CinerumRehd.etWils.的干燥藤莖。

粉防己堿、青藤堿對照品：含量測定用，由中國藥品生物制品檢定所提供。Agilent1100色譜工作站。

2方法與結果

2.1因素水平表根據文獻資料和預實驗結果，采用正交實驗法以乙醇濃度（A）、乙醇用量（B）、提取時間（C）、提取次數（D）為考察因素，各取3水平，具體因素水平見表1。表1提取工藝優選水平（略）

2.2醇提實驗根據表1，選用L9正交表，按各實驗號進行實驗。每次實驗按處方量稱取青風藤120g，防己90g，加熱回流，提取液進行濃縮，稱重，計算得膏率，分別稱取各組浸膏適量，甲醇溶解并定容至10ml容量瓶中，得9組供試品，分別測定青藤堿和粉防己堿的含量，測定青藤堿的HPLC條件：十八烷基硅烷為填充劑；甲醇乙腈水二乙胺（18∶14∶58∶0.1）為流動相；檢測波長為265nm。測定粉防己堿含量的HPLC條件：十八烷基硅烷為填充劑；甲醇乙腈水二乙胺（70∶10∶20∶0.1）為流動相；檢測波長為283nm。

2.3正交實驗及方差分析見表2～3。表2正交實驗設計（略）表3方差分析（略）

X：青風藤為方中臣藥，防己為佐藥，所以經過加權后，X=青風藤×60%+防己×40%。X1，X2分別表示兩次重復實驗所得數據經加權后的數值。

F0.05(2,17)=3.59,F0.01(2,17)=6.11,由方差分析表可知，4因素均有顯著性差異，根據實驗結果,因素D應取D3，即提取3次。因素B應取B3，即加10倍量醇。因素A應取A2,即70%醇提。因素C應取C2，即提取時間為2h。

2.4乙醇用量的單因素考察在其他因素確定的前提下，以粉防己堿和青藤堿含量為指標成分考察乙醇用量為14倍，18倍時工藝提取情況。結果見表4。表4乙醇用量的單因素考察（略）

乙醇用量為14倍時，提取的指標成分含量高，因此確定乙醇用量為14倍。

2.5工藝驗證取同樣藥材，按上述優選工藝進行操作，粉防己堿含量為0.34%。青藤堿含量為0.58%（與藥材比）。

3討論

根據正交實驗，確定防己和青風藤最佳提取工藝為以70%醇濃度的乙醇為提取液，加醇量為藥材的16倍，提取3次，2h/次。

防己、青風藤提取工藝中所依據的指標，采用的是將粉防己堿和青藤堿含量進行加權后的數值。加權系數應根據兩味藥物在方中所起的作用進行慎重選擇，本實驗確定臣藥青風藤的加權系數為0.6，佐藥防己的加權系數為0.4。

正交實驗中，因素B和D均具有顯著性差異，根據極差分析，所取水平均為設定的最高水平，因此應考察加醇量在10倍以上，提取次數在3次以上時的情況。結合大生產的實際情況和兩因素的交互作用，確定提取次數為3次，在此基礎上，對乙醇用量進行單因素考察，實驗結果表明，當乙醇用量為藥材量的14倍時，成分含量較高，提取較完全。新晨：

【參考文獻】

1］王勇,方勇飛,周新,等.青藤堿對佐劑性關節炎大鼠腹腔巨噬細胞表達細胞因子的影響［J］.中華風濕病學雜志,2003,7(7):415.

［2］陳光星,劉良,趙詩哲,等.青藤堿對膠原誘導型關節炎大鼠滑膜細胞增殖及凋亡影響的研究［J］.中華風濕病學雜志,2005,9(5):284.

［3］易丹丹,蔡鴻生,羅順德，等.青藤堿凝膠對大鼠佐劑性關節炎的治療作用［J］.中國醫院藥學雜志，2002，22（8）：465.

［4］張樂之，何華美，李新芳，等.粉防己堿的抗炎作用與炎癥白細胞cAMP的關系［J］.中國藥理學通報，2003，19(7):791.

［5］張樂之,何華美,李新芳，等.粉防己堿抗炎作用的研究進展［J］.解放軍藥學學報，2002，18（3）：172.

［6］王麗敏，呂宏彥，李慶勇，等.粉防己堿的抗腫瘤藥理研究新進展［J］.時珍國醫國藥，2008，19（10）：2558.

［7］常超,王裕勤,楊剛,等.粉防己堿對大鼠心肌缺血再灌注損傷的保護作用及其機制［J］.中國臨床康復，2006，10（43）：88.