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【摘要】目的探討冬蟲(chóng)夏草(蟲(chóng)草)及其與維生素C(VitC)、核酸組成的復(fù)方液對(duì)大鼠鎘致腎毒性的改善作用。方法清潔級(jí)SD大鼠24只,按體質(zhì)量配伍分3組:單染鎘組、蟲(chóng)草干預(yù)組、復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組。3組以CdCl2(以Cd計(jì)1mg/kg體質(zhì)量)皮下注射染毒,每周5次,共12次;染毒后蟲(chóng)草干預(yù)組給予蟲(chóng)草液,復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組給予復(fù)方蟲(chóng)草液(蟲(chóng)草+核酸+VitC),單染鎘組以等量蒸餾水,灌胃,連續(xù)3周。結(jié)果蟲(chóng)草干預(yù)組與復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)均明顯低于單染鎘組(P<0.05),復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組血清BUN顯著低于蟲(chóng)草干預(yù)組(P<0.05);蟲(chóng)草干預(yù)組與復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組血鎘、腎鎘含量均明顯低于單染鎘組(P<0.05);干預(yù)組每日尿鎘排出量均明顯高于單染鎘組(P<0.05);復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組腎鎘含量顯著低于蟲(chóng)草干預(yù)組(P<0.05)。結(jié)論蟲(chóng)草對(duì)鎘中毒性腎損傷有較明顯的改善作用,聯(lián)合核酸和VitC效果更佳,機(jī)制可能與促進(jìn)鎘排出有關(guān)。

【關(guān)鍵詞】冬蟲(chóng)夏草核酸類維生素C

隨著現(xiàn)代工業(yè)的發(fā)展,鎘污染日益嚴(yán)重,其防治研究越來(lái)越受到醫(yī)學(xué)界重視。研究表明,鎘中毒與鎘直接造成腎臟細(xì)胞毒性及機(jī)體氧化損傷有關(guān)[1],目前鎘中毒防治仍以藥物為主。冬蟲(chóng)夏草(簡(jiǎn)稱蟲(chóng)草)作為傳統(tǒng)的強(qiáng)壯滋補(bǔ)中藥,能增強(qiáng)免疫系統(tǒng)功能,提高機(jī)體免疫力,而且可明顯促進(jìn)體外培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)[23]。核酸和維生素C(VitC)具有較強(qiáng)的協(xié)同抗氧化作用[4],核酸還可促進(jìn)細(xì)胞增生和分化。筆者研究上述3種物質(zhì)對(duì)大鼠中毒性腎損傷的影響,為防治鎘中毒途徑提供新線索。

1材料與方法

1.1動(dòng)物與分組雄性SD大鼠24只,體質(zhì)量(206.65±13.36)g,由上海西普爾必凱公司提供(合格證號(hào):醫(yī)動(dòng)字第02492號(hào))。按體質(zhì)量配伍分成3組:單染鎘組、蟲(chóng)草干預(yù)組、復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組,每組8只。鎘中毒模型制備參照文獻(xiàn)[5]:3組均以氯化鎘(CdCl2,以Cd計(jì)1mg/kg)皮下注射染毒,每周5次,共12次。干預(yù)方法:蟲(chóng)草干預(yù)組以25mg／kg蟲(chóng)草混懸液,復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組以復(fù)方蟲(chóng)草液(25mg/kg蟲(chóng)草+核酸+VitC),單染鎘組以等量蒸餾水,每天1次灌胃,連續(xù)3周。

蟲(chóng)草(福建省食用菌公司),核酸(福州正分子公司,DNA23%,RNA77%)。

1.2樣本采集

1.2.1尿液動(dòng)物處死前按組置于代謝籠中,收集24h尿液。

1.2.2血液動(dòng)物處死前晚9:00撤食,次日晨斷頭,立即取全血0.5mL用于測(cè)血鎘,血清用于測(cè)定尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)。

1.2.3腎臟動(dòng)物處死后立刻取出左側(cè)腎臟,稱質(zhì)量,消化后測(cè)鎘含量。

1.3觀察指標(biāo)與測(cè)定方法尿Cr用堿性苦味酸比色法測(cè)定;血清BUN、Cr用全自動(dòng)生化分析儀(EOSbravo,意大利HospltexDiagnostecs公司)測(cè)定;其余樣本以1∶4硝酸(優(yōu)級(jí)純)與高氯酸(優(yōu)級(jí)純)混合液消化,雙蒸水定容,用火焰原子吸收分光度法測(cè)含鎘量。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS12.0軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。

2結(jié)果

2.1血清BUN、Cr水平兩干預(yù)組BUN、Cr低于單染鎘組(P<0.05),復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組低于蟲(chóng)草干預(yù)組(P<0.05,表1)。表1大鼠血清尿素氮和肌酐水平n＝8.與單染鎘組比較,☆:P<0.05;與蟲(chóng)草干預(yù)組比較,#:P<0.05.

2.2血、尿、腎鎘含量、尿鎘排出量3組血鎘、尿鎘日總排出量、腎鎘含量有差別(P<0.05)。蟲(chóng)草干預(yù)組、復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組尿鎘含量有增加趨勢(shì),但差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。蟲(chóng)草干預(yù)組和復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組的血、尿、腎鎘含量與單染鎘組比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),兩干預(yù)組腎鎘含量比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05,表2)。表2大鼠血、尿、腎鎘含量、尿鎘排出量

3討論

3.1鎘致腎毒性鎘進(jìn)入人體后主要分布于肝、腎、骨骼、血液等,腎臟是鎘最主要的蓄積部位和靶器官之一,慢性接觸鎘所致的腎損傷是對(duì)人體的主要危害[1]。本研究應(yīng)用中國(guó)傳統(tǒng)補(bǔ)腎中藥冬蟲(chóng)夏草及冬蟲(chóng)夏草與VitC、核酸復(fù)方液對(duì)染毒后大鼠進(jìn)行干預(yù),觀察對(duì)大鼠鎘致腎損傷的影響。

3.2蟲(chóng)草對(duì)鎘致腎毒性的改善作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,蟲(chóng)草可以明顯降低血清BUN、Cr水平,并且降低腎鎘含量,提示蟲(chóng)草對(duì)鎘引起的腎功能損害有明顯的保護(hù)作用。鎘對(duì)腎臟的損傷主要造成腎小管上皮細(xì)胞的壞死,繼而引起腎小球的損傷,其產(chǎn)生的腎臟毒性與鎘造成氧化損傷和微量元素的平衡紊亂有關(guān)[5];蟲(chóng)草對(duì)腎功能的保護(hù)作用可能與蟲(chóng)草可以促進(jìn)體外腎小管上皮細(xì)胞的增生,保護(hù)腎小管的功能,從而減緩鎘引起的腎功能損傷,以及它具有抗脂質(zhì)過(guò)氧化、提高機(jī)體免疫力有關(guān)[3,56]。此外,蟲(chóng)草含有豐富的無(wú)機(jī)元素（如鈣、鋅、銅）,可能對(duì)腎臟微量元素平衡紊亂有拮抗作用[7]。

鎘在體內(nèi)首先經(jīng)血液進(jìn)入肝臟,并誘導(dǎo)肝臟合成金屬硫蛋白(MT),MT與鎘絡(luò)合為鎘金屬硫蛋白(CdMT)并可能以CdMT的形式通過(guò)血液運(yùn)轉(zhuǎn)到腎臟;血中CdMT進(jìn)入腎小球?yàn)V液后,部分被腎小管上皮細(xì)胞重吸收,未被吸收的部分則從尿中排出[8]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果單染鎘組血鎘含量明顯高于干預(yù)組,說(shuō)明蟲(chóng)草可以降低血鎘的含量。蟲(chóng)草干預(yù)組與復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組每日尿鎘排出量明顯高于單染鎘組(P<0.05),兩干預(yù)組腎鎘含量均明顯低于單染鎘組,且其每日尿鎘排出量明顯高于單染鎘組,提示冬蟲(chóng)夏草可能有一定的促排鎘作用。而蟲(chóng)草干預(yù)組與復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組每克肌酐尿鎘含量雖比單染鎘組高,但在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異卻無(wú)顯著性,這可能與尿鎘指標(biāo)個(gè)體差異較大、樣本量太小或尿樣收集時(shí)間較短有關(guān)。對(duì)腎小管上皮細(xì)胞損害的保護(hù)作用,需繼續(xù)病理學(xué)研究。

3.3蟲(chóng)草與蟲(chóng)草+VitC+核酸對(duì)鎘致腎毒性改善作用比較研究發(fā)現(xiàn),復(fù)方蟲(chóng)草干預(yù)組血清BUN、腎鎘含量比蟲(chóng)草干預(yù)組低,說(shuō)明蟲(chóng)草+VitC+核酸比單一使用蟲(chóng)草對(duì)腎功能的保護(hù)效果更好,其機(jī)制可能與VitC具有抗氧化、解毒作用,核酸具有清除自由基和抗氧化、促進(jìn)細(xì)胞增生和分化作用有關(guān)[9],從而保護(hù)腎臟免受鎘性損傷,促進(jìn)腎小管上皮細(xì)胞盡快修復(fù)，該機(jī)制尚需深入探討。